虽然标准的诱导治疗最初在大多数急性髓性白血病(AML)患者中引起了可喜的反应，但大多数患者都会复发。化疗后存活的白血病干细胞（LSCs）被认为是急性髓细胞白血病复发的原因。因此，迫切需要能消除LSCs的新疗法。
ONC201是一种TRAIL诱导剂，是咪唑啉酮家族的创始成员。它已被证明能诱导LSCs的凋亡（Ishizawa等，Science Signaling. 2016; 9:ra17）。ONC201经过化学修饰，提高了对癌细胞的效力和选择性，形成了新的类似物ONC213。在这项研究中，我们研究了ONC213在临床前AML模型中的抗白血病活性和基本分子机制。
首先在体外测试了ONC213在AML细胞系和原发性AML患者样本中的活性。MTT检测结果显示，在AML细胞株和原发性AML患者样本中，ONC213的IC50s在91.7 nM到2.4 µM之间，根据小鼠PK研究的结果，这些IC50s在体内是可以达到的（单剂量50和100 mg/kg ONC213的血浆峰值浓度分别为3.7 μM和8 μM）。Annexin V/Propidium iodide染色和流式细胞仪分析结果显示，测试的AML细胞系的反应各不相同。用500nM ONC213处理48小时后，检测到MOLM-13和MV4-11细胞有明显的诱导细胞死亡（至少72%的附件素V+细胞），而THP-1和U937细胞显示附件素V+细胞几乎没有增加（6-11%）。在原发性AML患者样本中也得到了类似的结果。与THP-1和U937细胞的48小时处理相比，将处理时间增加到120小时，会有超过50%的附件V+细胞，这表明在一些细胞系中需要更长的暴露时间。在MV4-11和MOLM-13细胞中，ONC213处理后8至12小时检测到细胞死亡的开始。菌落形成试验显示，与车辆对照相比，ONC213处理明显降低了原发性AML患者样本的菌落形成能力，使之低于5%，而对正常造血祖细胞没有明显影响。用或不用ONC213处理原发性AML患者样本48小时，移植到NSG小鼠体内，10周后收获骨髓并测量人CD45+细胞。与车辆对照组相比，ONC213治疗明显减少了人类AML的移植（0.6% vs. 21.3%；P<0.05），表明ONC213在体外杀死了LSCs。接下来，我们检查了ONC213对AML细胞系衍生的异种移植小鼠模型的体内疗效。将MV4-11细胞通过尾静脉注射到NSGS小鼠体内。注射后三天，将小鼠随机分为车辆对照组或125mg/kg ONC213组（每组5只小鼠），每天治疗8天。注意到有适度的体重下降，但完全可以控制。ONC213治疗使小鼠的生存期延长了88%（中位生存期62天对33天）。
与ONC201不同，ONC213治疗AML细胞并没有增加TRAIL的表达。有趣的是，RNAseq结果显示，500nM的ONC213治疗48小时，下调了氧化磷酸化（OXPHOS）途径中的33个mRNAs，表明ONC213治疗降低了AML细胞的OXPHOS。至此，在ONC213处理8小时和48小时后，其中6个下调的mRNAs（UQCRQ、SDHA、COX6C、NDUFS5、ATP5D和NDUFB1）都被实时RT-PCR验证了。LSCs已被证明高度依赖OXPHOS，而正常造血干细胞和一些散装AML细胞在OXPHOS被抑制时可转为糖酵解来产生ATP。因此，ONC213可能通过抑制OXPHOS而杀死LSCs。
除了OXPHOS相关基因的下调外，我们还发现ONC213处理会下调Mcl-1。由于Mcl-1介导了对有前途的Bcl-2选择性抑制剂ABT-199（Venetoclax）的耐药性，而对Bcl-2的抑制会损害OXPHOS，所以ONC213可能会与ABT-199在AML细胞中产生协同作用。事实上，联合治疗在AML细胞系和原发性患者样本中都产生了显著的协同诱导细胞凋亡的作用。在MOLM-13和MV4-11细胞中，联合治疗后8小时检测到细胞死亡增强。集落形成实验的结果显示，该组合能使正常的造血祖细胞得到保存。综上所述，ONC213作为单药和与ABT-199联合治疗急性髓系白血病具有活性。
本文来源于互联网，如有侵权请联系删除。来源：https://ashpublications.org/blood/article/132/Supplement%201/3936/265254/Venetoclax-Synergistically-Enhances-the?searchresult=1
简体中文